暗视野观察\暗场（Dark field）暗视野观察也叫暗场，暗视野实际是暗场照明。它的特点和明视野不同，不直接观察到照明的光线，而观察到的是被检物体反射或衍射的光线。因此，视场成为黑暗的背景，而被检物体则呈现明亮的像。暗视野的原理是根据光学上的丁道尔现象，微尘在强光直射通过的情况下，人眼不能观察，这是因为强光绕射造成的。若把光线斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了体积，为人眼可见。暗视野观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜。它的特点是不让光束由下至上的通过被检物体，而是将光线改变途径，使其斜射向被检物体，使照明光线不直接进入物镜，利用被检物体表面反射或衍射的光形成明亮图像。暗视野观察的分辨率远高于明视野观察，最高达0.02—0.004mm。
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2019
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复消色差物镜（Apochromatic objective）这类物镜的结构复杂，透镜采用了特种玻璃或萤石等材料制作而成，物镜的外壳上标有'Apo'字样。它对两个色光实现了正弦条件，要求严格地校正轴上点的位置色差（红、蓝二色）、球差（红、蓝二色）和正弦差，同时要求校正二级光谱（再校正绿光的位置色差）。其倍率色差并不能完全校正，一般须用目镜补偿。
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1、校正目镜分划板十字线将目镜上的卡榫插入镜筒上适当的卡口，使目镜分划板十字线处于东西（横丝）、南北（竖丝）方向。 2、偏光镜的校正 （1）确定下偏光镜（起偏振镜）的振动方向将上偏光镜（检偏振镜）自镜中推出，只用下偏光镜观察工作台上。转动工作台，当黑云母解理缝与下偏光镜的振动方向平行时，对黑云母吸收性最强，此时呈现深棕色；当解理缝与起偏镜的振动方向垂直时，黑云母吸收性微弱，此时晶体呈现淡黄色，据此就能确定起偏振镜的振动方向。 （2）调整下偏光镜的振动方向与目镜分划板十字线横丝平行将黑云母解理缝与目镜分划板十字线横丝平行，转动下偏光镜至黑云母呈现深棕色位置，此时下偏光镜的振动方向平行横丝，其刻线应对准0°或180°。 （3）确定上偏光镜（检偏振镜）与下偏光镜（起偏光镜）的振动方向正交将黑云母切片取出，推入上偏光镜，如果视域呈黑暗，则上、下偏光镜振动方向正交；否则转动上偏光镜直至视域最黑暗。 3、物镜中心调节方法（1）观察旋转工作台上的切片，在切片中找一小黑点，使之位于目镜十字线中心。 （2）转动工作台，若物镜光轴中心0与工作台中心不一致，黑点即离开十字线中心绕一个圆转动。圆的中心S即为工作台的中心。 （3）将小黑点转至距十字线中心最远的一点处，旋转物镜座上两个调节螺丝使小黑点自1处移至0-1直线...
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偏光显微镜在光学显微镜的光学系统中插入了起偏振镜和检偏振器，用以检查样品的各向异性和双折射性的显微镜。起偏振镜和检偏振镜都是由偏光棱镜或偏光板的尼科耳(nicol)棱镜制成。前者安装在光源与样品之间，后者安装在接物镜与接目镜之间或接目镜之上。在生物样品中，肌肉纤维、骨骼和牙齿等具有各向异性，淀粉粒、染色体和纺锤体等具有双折射性，因此被用于组织细胞的化学研究。光源最好用单波长光线。由于生物样品比金相、岩石或结晶的双折射性显著微弱，所以有时也借敏感的检偏振板造成的相加相减现象而利用其干涉色。偏振光的基础知识 一、自然光和偏振光 光是一种电磁波，属于横波(振动方向与传播方向垂直)。一切实际的光源，如日光、烛光、日光灯及钨丝灯发出的光都叫自然光。这些光都是大量原子、分子发光的总和。虽然某一个原子或分子在某一瞬间发出的电磁波振动方向一致，但各个原子和分子发出的振动方向也不同，这种变化频率极快，因此，自然光是各个原子或分子发光的总和，可认为其电磁波的振动在各个方向上的几率相等。 自然光在窗过某些物质，经过反射、折射、吸收后，电磁波的振动波以被限制在一个方向上，其他方向振动的电磁波被大大削弱或消除。这种在某个确定方向上振动的光称为偏振光。偏振光的振动方向与光波传播方向所构成的平面称为振动面。 二、直线偏振光、圆偏振光及椭圆偏振光 1.直线偏振光 直线偏振光由于光线的振动方向都在同一个...
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景深在照相时是指成像画面内近处物体与远处物体之间的距离，如果在一张照片内近处的景物与远处的景物都很清晰说明景深大。照相机的景深可以根据照片需要展现的效果做适当调整。显微镜一般都是垂直向下取景的，通过视场直径内观察到的物体表面凸起的位置与凹下的位置都能够看的很清楚时，那么凸点与凹点之间的高度差就是景深了，对于显微镜来说景深越大越好，景深越大在观察高低不平整的物体表面时，能够得到更好更立体的清晰度画面。显微镜的景深计算方法景深表示,象平面上清晰的象所对应物平面的前后空间的深度：dtot=(λ*n)/NA + n/(M∗NA) * e例：40.5um =（0.55um * 1）/0.1 + 1/(4*0.1)*14um (这里取中间值14um)注：这里以4x物镜为例公式中：dtot：景深NA ：数值孔径M ：总放大率λ： 光波波长, （通常λ=0.55um）n : 试样与物镜之间介质的折射率（空气: n=1、油: n=1.515）e : 可分辨的最小距离，检测器被放置在显微镜物镜的像面，其横向放大率是 M（e一般是4um、5um、6um......24um） 显微镜的景深计算方法物镜4X10X40X100X数值孔径0.10.250.651.25数值孔径（N.A.）计算公式数值孔径是判断物镜性能（分辨...
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1、使用方法 （1）装好显微镜后，在确保供电电压与显微镜的额定电压一致后方可插上电源插头，打开电源开关，并选择照明方式。 （2）根据所观察的标本，选好台板（观察透明标本时，选用毛玻璃台板；观察不透明标本，选用黑白台板），装入底座台板孔内，并锁紧。 （3）松开调焦滑座上的紧固螺钉，调节镜体的高度，目测工作距离在100mm左右，（使其与所选用的物镜放大倍数大体一致的工作距离）调好后，锁紧托架，将安全环紧靠调焦托架并锁紧。 （4）装好目镜，先将目镜筒上的螺钉松开，装好目镜后再将此螺钉拧紧（目镜放进目镜筒时，要特别小心，不要手触摸镜头透镜表面）。 （5）调好瞳距，当使用者通过两个目镜观察视场时中不是一个圆形视场时，应扳动两棱镜箱，改变目镜筒的出瞳距离，使之达到能观察到一个完全重合的圆形视场（说明瞳距已调好）。 （6）观察标本（对标本调焦）。先将左目镜筒上的视度圈调至0刻线位置。通常情况下，先从右目镜筒（即固定目镜筒）中观察，将变倍筒（有变倍装置机型时）转至最高倍位置，转动调焦手轮对标本调焦，直至标本的像清晰后，再把变倍筒转至最低倍位置，此时，用左目镜筒观察，如不清晰则沿轴向调节目镜筒上的视度圈，直到标本的像清晰，然后再双目观察其调焦效果。 （7）结束观察时，关掉电源，移走标本，用防尘罩将显微镜严密罩盖。 2、显...
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