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生物显微镜检验---结核菌染色液的染色操作方法

日期: 2019-07-02
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TB菌因细胞璧富含脂质,因此能抵抗盐酸酒精的脱色。

TB Stain结核菌染色液为化学染色剂,主要用于对结核杆菌等抗酸性菌的化学染色。抗酸染色一般有二种常用方法:1)硷性复红法(Ziehi-Neelsen法);2)萤光染色金胺O法(也称为金胺O-罗丹明法)。本染剂系应用的方法原理改良而成,染色过程不必加热。

结核菌、麻疯杆菌等抗酸性菌,因其菌体表面有一层类脂或脂质之皮膜不易着色,但一经着色后,酸及乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用此特性并以增强的染色予以染色,然后再以酸及乙醇加以处理,使其脱色后对比染色,此时抗酸性菌仍是固定着最初染上的颜色(红色),也就易于监别。

结核菌染色液 试药内容:

  • 1. Carbolfuchsin x 1  250ml(碳酸复红溶液)

  • 2. Acid Alcohol x 2  250ml(酸性酒精)

  • 3. Counter Stain x 1  250ml(复染剂)

操作方法:

  • 1. 涂片经火焰固定,加碳酸复红溶液于涂片上,染色10min。(不需加温步骤 )

  • 2. 放冷后,水洗。(水洗之后,尽可能将水份沥乾或以滤纸吸干)。

  • 3. 加酸性酒精脱色2min。

  • 4. 水洗。(假设标本面还可以看到残存红色时,再添加酸性酒精至完全脱掉红色为止)。

  • 5. 加复染剂染色10~30秒,水洗、干燥、镜检。

结果判定:
抗酸性菌(为结核菌)呈红色,其它细菌及细胞呈蓝色。
结核菌长1.3~3.5μm,宽0.3~0.5μm,有点弯曲之杆菌,没有鞭毛和芽孢,属难染性菌,但抗酸性染色可显着被染色。


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