1、载玻片载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的玻片,一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。 2、盖玻片盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有若干层对不同波长的光起不同干涉作用的物质(如氟化镁)的盖玻片,它可以使荧光顺利通过,而反射激发光,这种反射的激发光女可激发标本。 3、标本组织切片或其他标本不能太厚,如太厚激发光大部分消耗在标本下部,而物镜直接观察到的上部不充分激发。另外,细胞重叠或杂质掩盖也会影响判断。 4、封裱剂封裱剂常用甘油,必须无自发荧光,无色透明,荧光的亮度在pH8.5~9.5时较亮,不易很快褪去。所以,常用甘油和0.5mol/l pH9.0~9.5的碳酸盐缓冲液的等量混合液作封裱剂。 5、镜油一般暗视野荧光显微镜和用油镜观察标本时,必须使用镜油,最好使用特制的无荧光镜油,也可用上述甘油代替,液体石蜡也可用,只是折光率较低,对图像质量略有影响。
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1、每种荧光染料,均有自己的最适PH值,此时荧光最强。当pH改变时,不仅荧光强度减弱,而且波长将有所改变,因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。2、荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定,温度升高常出现温度猝灭。3、在荧光观察中,常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭,造成观察和照相困难。为此最好用能量小的长波长光进行观察,需照相时再适当增强激发光。4、一般荧光染液的浓度在万分之一以下,甚至亿万分之一,也能使标本着色。在一定的限度内,荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强,但超过限度,荧光强度反而下降,这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。
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1、严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作,不要随意改变程序。2、应在暗室中进行检查。进入暗室后,接上电源,点燃超高压汞灯5~15min,待光源发出强光稳定后,眼睛完全适应暗室,再开始观察标本。3、防止紫外线对眼睛的损害,在调整光源时应戴上防护眼镜。4、检查时间每次以1~2h为宜,超过90min,超高压汞灯发光强度逐渐下降,荧光减弱;标本受紫外线照射3~5min后,荧光也明显减弱;所以,最多不得超过2~3h。5、荧光显微镜光源寿命有限,标本应集中检查,以节省时间,保护光源。天热时,应加电扇散热降温,新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时,须待灯泡充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。6、标本染色后立即观察,因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延缓荧光减弱时间,防止封裱剂蒸发。7、荧光亮度的判断标准:一般分为四级,即:(1)第一级“—”:无或可见微弱荧光;(2)第二级“+”:仅能见明确可见的荧光;(3)第三级“++”:可见有明亮的荧光;(4)第四级“+++”:可见耀眼的荧光。
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什么是金相学? 研究金属或合金内部结构的科学,主要使用的设备就是金相显微镜,使用金相显微镜的金相方法观察到的金属及合金的内部组织。 除此以外它还研究当外界条件或内在因素改变时,对金属或合金内部结构的影响。所谓外部条件就是指温度、加工变形、浇注情况等。所谓内在因素主要指金属或合金的化学成分。金相组织是反映金属金相的具体形态,如马氏体,奥氏体,铁素体,珠光体等等。 金相学的主要形态: 珠光体 铁碳合金中国析反应所形成的铁素体与渗碳体的机械混合物。 珠光体的片间距离取决于奥氏体分解时的过冷度。过冷度越大,所形成的珠光体片间距离越小。在a1~650℃形成的珠光体片层较厚,在金相显微镜下放大400倍以上可分辨出平行的宽条铁素体和细条渗碳体,称为粗珠光体、片状珠光体,简称珠光体。在650~600℃形成的珠光体用金相显微镜放大500 倍,从珠光体的渗碳体上仅看到一条黑线,只有放大1000倍才能分辨的片层,称为索氏体。在600~550℃形成的珠光体用金相显微镜放大500倍,不能分辨珠光体片层,仅看到黑色的球团状组织,只有用电子显微镜放大10000倍才能分辨的片层称为屈氏体。 铁素体 碳与合金元素溶解在a-fe中的固溶体。亚共析钢中的慢冷铁素体呈块状,晶界比较圆滑,当碳含量接近共析成分时,铁素体沿晶粒边界析出...
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金属镀层显微镜分析镀层检测的方案的适用人群:金属材料,钢铁配件,表面处理厂等,电镀工件,PCB铜镍镀层等。金属镀层显微镜分析镀层检测方案目的:用深圳润兴光学的镀层检测显微镜来观察工件表面涂层厚度的分部及测量各部位涂层的厚度。所需仪器如下:金相检测显微镜一套;金相切割机一台;镶嵌机一台;金相预磨机一台;金相抛光机一台;金相设备相关辅料;所需分析金属材料样品;操作流程试样切割,用切割机截取部分试样。切取的试样如果很小,不能直接用手拿着来磨平,需使用镶嵌机进行镶嵌。(应根据所取试样的大小来选择合适的镶嵌机型号,镶嵌机模具直径小,试样无法放进去进行镶嵌,模具直径大,浪费镶嵌填充耗材。在选取镶嵌填充料时,应根据涂层的颜色来选择适合颜色的镶嵌料,以免涂层颜色和镶嵌料颜色一样无法分辨涂层厚度)试样镶嵌后外观图试样预磨:手持镶嵌好的试样后在预磨机上先用粗砂纸预磨,在逐步换用细砂纸打磨。试样抛光:将试样表面抛光成没有打磨痕迹的镜面。观察与分析:抛光好的试样先从显微镜目镜筒里面观察试样各个区域的涂层分布情况,然后选取特定区域成像至电脑上进行涂层厚度测量。镀层检测显微镜下涂层厚度分布及测量图例:图片左右侧深灰色部分是镶嵌材料,中间是母材,母材上下端是镀层厚度。在进行涂层测量时由于各部分涂层厚度均不一样,可以多选择几个测量区域,并在每个测量区域内多测量几组数据求平均值。镀层分析软件有将测量数据导出至Exc...
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Q:金相显微镜光阑的作用是什么?A:在光学系统中,不论是限制成像光束的光孔,或者是限制成像范围的光孔或框,都统称为光阑。光阑属于光学仪器(光具组)中的一种光学元件。按其作用的不同,分为孔径光阑和视场光阑两种。 孔径光阑为限制入射光束大小的孔,其大小和位置对透镜所成像的清晰程度、正确性和亮度都有决定性的作用。如照相机镜头上的圆形光阑(俗称光圈)。 视场光阑是限制成像景物的面积大小(视场)所用的孔。例如照相系统中的底片框。
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